蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)處理——搜庫
1.前言
MaxQuant是一款免費(fèi)的蛋白質(zhì)組學(xué)軟件包,由馬克斯-普朗克生物化學(xué)研究所開發(fā)。它內(nèi)置了自己的搜索引擎Andromeda,可以支持目前主流的蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜儀廠商產(chǎn)生的原始數(shù)據(jù)格式。MaxQuant支持標(biāo)記定量和非標(biāo)定量,2.0版本后的MaxQuant還支持DIA的數(shù)據(jù)分析。MaxQuant具備非線性質(zhì)量校正和Match Between Runs功能,可以增加蛋白鑒定數(shù)量和提高定量準(zhǔn)確性。下面我們主要以非標(biāo)定量蛋白質(zhì)組學(xué)(LFQ)數(shù)據(jù)為例,向大家演示MaxQuant數(shù)據(jù)庫檢索的過程。
2. MaxQuant下載安裝
官網(wǎng):MaxQuant
MaxQuant下載需要用郵箱注冊(cè),并填寫注冊(cè)碼。
該軟件依賴.NET Framework(基于.net框架編寫,有些沒安裝的電腦需要安裝)
解壓后無需安裝,點(diǎn)擊MaxQuant.exe即可使用。
3.操作步驟
3.1上傳LC-MS數(shù)據(jù)即raw data

3.2 上傳數(shù)據(jù)
點(diǎn)擊load上傳數(shù)據(jù),選擇數(shù)據(jù)所在文件夾,選中LC-MS數(shù)據(jù),點(diǎn)擊 No fraction 設(shè)置實(shí)驗(yàn)序號(hào),進(jìn)行下一步


3.3 參數(shù)設(shè)置
設(shè)置蛋白質(zhì)是否有修飾,常規(guī)無標(biāo)定量蛋白組學(xué)一般不需要修改,直接默認(rèn)參數(shù)就可以

3.4 酶切參數(shù)設(shè)置
樣品在處理時(shí),一般用什么酶做酶切就選擇什么酶

3.5 修改為LFQ

此外,instrument項(xiàng)中可將Main search peptide tolerate改為10(ppm)
3.6 添加所物種的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫

3.7 物種蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫在uniport上下載
(在本例中以大鼠(Rat)為例)

3.8 上傳物種蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)庫
數(shù)據(jù)庫是隨時(shí)可能更新的,所以時(shí)隔一段時(shí)間后所搜得到的結(jié)果可能會(huì)不一樣,屬于正?,F(xiàn)象

3.9 線程數(shù)根據(jù)所用電腦的處理器配置進(jìn)行設(shè)置
點(diǎn)擊開始按鈕即可開始搜庫,等待搜庫完成

3.10 得到搜庫結(jié)果——proteinGroups文件

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