提到 “抗體”，你可能會想到疫苗接種后身體產生的 “免疫衛士”—— 但在科研、診斷和治療中，我們需要的往往是 “精準可控” 的抗體。傳統抗體（如多克隆抗體、雜交瘤單克隆抗體）要么特異性差、要么生產不穩定，而 “重組抗體” 通過基因工程技術，實現了抗體的 “定制化設計與標準化生產”，成為生物醫藥領域的 “核心工具”。今天，我們就用通俗的語言，拆解重組抗體的 “前世今生”、制備邏輯與應用價值。

一、先搞懂：為什么需要 “重組抗體”？

• 多克隆抗體：從動物血清中提取，包含多種抗體，能結合多個抗原位點 —— 但特異性差，比如用它做 Western Blot（WB），容易出現雜帶，而且不同批次的血清差異大，實驗結果難重復；
• 雜交瘤單克隆抗體：通過小鼠雜交瘤細胞生產，能產生單一特異性抗體 —— 但生產周期長（需 2-3 個月），細胞容易污染或失活，且小鼠抗體用于人體治療時，可能引發免疫排斥（比如 “鼠源抗體綜合征”）。

二、重組抗體是什么？——“基因拼出來的精準抗體”

三、重組抗體怎么造？—— 四步實現 “從基因到抗體”

1. 第一步：獲取 “抗體基因片段”—— 找到 “精準識別靶點” 的核心

• 從雜交瘤細胞中克隆：如果已有能識別目標抗原的雜交瘤細胞，可直接提取細胞的 RNA，通過反轉錄得到 cDNA，再用特異性引物擴增 VH 和 VL 基因；
• 從抗體文庫中篩選：如果沒有現成細胞，可構建 “重組抗體文庫”（如噬菌體展示文庫、酵母表面展示文庫，之前聊過的酵母表面展示技術就常用在這里），通過抗原親和篩選，找到能特異性結合的 VH/VL 基因片段。

2. 第二步：構建 “表達載體”—— 給基因搭好 “生產框架”

• 啟動子 / 終止子：控制抗體基因何時開始、停止表達（比如用 CMV 啟動子，在哺乳動物細胞中高效啟動表達）；
• 篩選標記：比如抗生素抗性基因，確保只有成功導入載體的細胞才能存活（方便后續篩選）；
• 標簽序列（可選）：比如 His 標簽、Flag 標簽（之前科普過的 Flag 標簽就常用在這里），方便后續抗體純化。

3. 第三步：選擇 “表達系統”—— 選對 “抗體生產工廠”

• 大腸桿菌系統：適合生產 “抗體片段”（如 scFv、Fab），成本低、生長快，但無法進行糖基化修飾（完整抗體需要糖基化維持活性）；
• 酵母系統（如畢赤酵母）：能進行基礎糖基化，適合生產 “完整抗體” 或 “分泌型抗體片段”，產量比大腸桿菌高，成本比哺乳動物細胞低；
• 哺乳動物細胞系統（如 CHO、HEK293）：能進行人類一致的糖基化修飾，生產的完整抗體在結構和活性上最接近天然人類抗體，是 “治療性重組抗體” 的首選（比如 PD-1 抗體、曲妥珠單抗都用 CHO 細胞生產）；
• 無細胞表達系統：適合快速生產 “有毒性的抗體片段”，幾小時就能出結果，用于科研快速篩選。

4. 第四步：純化與鑒定 —— 拿到 “高純度、有活性” 的抗體

• 帶 His 標簽的抗體，用鎳柱純化；帶 Flag 標簽的，用抗 Flag 抗體偶聯的柱子；
• 完整抗體可利用 “蛋白 A/G 層析”（蛋白 A/G 能特異性結合抗體的 Fc 段），純化后純度可達 95% 以上。

四、重組抗體的 “過人之處”：比傳統抗體好在哪？

1. 特異性更高，實驗結果更可靠

2. 可 “定制化改造”，應用更靈活

• 改片段：把完整抗體改成 scFv（單鏈抗體，分子量小，能穿透腫瘤組織），用于靶向藥物遞送；
• 加標簽：融合 GFP 熒光標簽，直接觀察抗體在細胞內的定位；
• 雙特異性：讓一個抗體同時結合 “腫瘤細胞抗原” 和 “免疫細胞抗原”（如 CD3），引導免疫細胞殺死腫瘤（比如治療白血病的雙抗藥物）；
• 人源化：把小鼠抗體的可變區嫁接到人抗體的恒定區上，減少人體免疫排斥，用于治療（如早期的鼠源單克隆抗體人源化后，副作用大幅降低）。

3. 生產穩定，批次差異小

4. 生產周期短，成本可控

五、重組抗體用在哪？—— 覆蓋科研、診斷、治療全場景

1. 生物制藥：治療性抗體的 “絕對主力”

• 癌癥治療：如曲妥珠單抗（Herceptin），是重組抗 HER2 抗體，用于治療 HER2 陽性乳腺癌；PD-1 抗體（如帕博利珠單抗），是重組人源化抗體，通過阻斷 PD-1/PD-L1 通路激活免疫，殺死腫瘤細胞；
• 自身免疫病：如阿達木單抗（Humira），是重組抗 TNF-α 抗體，用于治療類風濕關節炎、銀屑病；
• 傳染病預防：如新冠中和抗體，是重組全人源抗體，能特異性結合新冠病毒的刺突蛋白，阻止病毒感染細胞。

2. 臨床診斷：精準檢測的 “核心探針”

• 抗原檢測：新冠抗原檢測試劑盒中的 “檢測線抗體”，就是重組抗新冠 N 蛋白的抗體，能特異性結合病毒抗原，出現紅色條帶；
• ELISA 檢測：比如乙肝病毒（HBV）檢測、腫瘤標志物（如 CA125、PSA）檢測，都用重組抗體作為 “捕獲抗體” 和 “檢測抗體”，確保檢測的特異性和靈敏度；
• 免疫組化（IHC）：病理切片中檢測腫瘤蛋白（如 Ki-67、HER2）的抗體，多為重組單克隆抗體，能幫助醫生判斷腫瘤類型和分期。

3. 科研工具：分子生物學實驗的 “常規武器”

• Western Blot（WB）：檢測蛋白表達量，用重組抗體識別目標蛋白，避免雜帶干擾；
• 免疫沉淀（IP/Co-IP）： pull-down 目標蛋白或其互作蛋白，重組抗體的高特異性能減少非特異性結合的雜蛋白；
• 流式細胞術（FACS）：分析細胞表面標志物（如 CD4、CD8），用熒光標記的重組抗體，精準區分細胞亞群。

六、未來趨勢：重組抗體還能更 “強” 嗎？

• AI 輔助設計：通過 AI 預測抗體的結構和親和力，直接設計出 “最優序列”，不用再篩選海量文庫，比如某團隊用 AI 設計的抗流感病毒重組抗體，親和力比傳統篩選的高 10 倍；
• 多特異性抗體：除了雙特異性，還在研發 “三特異性抗體”，同時靶向腫瘤、免疫細胞和血管內皮細胞，進一步提升治療效果；
• 聯合療法：把重組抗體和化療藥物、核素（如之前聊過的 TRT 技術）偶聯，形成 “抗體藥物偶聯物（ADC）” 或 “放射免疫偶聯物（RIC）”，實現 “精準遞送 + 高效殺傷”，比如治療乳腺癌的 DS-8201 就是 ADC 藥物。

總結：重組抗體的核心價值 ——“讓抗體為我所用”