蛋白表達服務｜重組蛋白表達｜高效蛋白純化

蛋白表達技術是將目標基因在體內或體外轉錄翻譯為功能蛋白的關鍵過程，廣泛應用于結構生物學、藥物開發、疫苗研發及生物工程等領域。高效、穩定的蛋白表達依賴于合適的表達系統選擇、基因優化、表達條件調控以及蛋白純化技術。
蛋白表達系統分類及技術特點
原核表達系統（E. coli Expression System）
原核系統以大腸桿菌為主，具有表達速度快、成本低的優勢，適用于多數非糖基化蛋白的生產。蛋白易形成包涵體，需要通過優化誘導條件、融合標簽等手段提高蛋白的可溶性。
酵母表達系統（Yeast Expression System）
作為真核微生物，酵母系統具備一定的糖基化能力，常用畢赤酵母可實現高效分泌表達，適合表達具有部分翻譯后修飾的蛋白。
昆蟲細胞表達系統（Insect Cell Expression System）
利用桿狀病毒載體，昆蟲細胞能有效表達具備復雜三級結構和翻譯后修飾的蛋白，廣泛應用于疫苗抗原和生物活性蛋白制備。
哺乳動物表達系統（Mammalian Cell Expression System）
哺乳動物細胞如CHO和HEK293，支持完整的翻譯后修飾，適用于抗體及復雜重組蛋白的高質量表達。
無細胞表達系統（Cell-Free Expression System）
無細胞系統基于細胞裂解液進行蛋白合成，突破細胞培養限制，表達周期短，適合快速篩選和有毒蛋白表達。
蛋白表達流程關鍵技術
1、基因克隆與密碼子優化
設計并合成優化密碼子的基因序列，提高翻譯效率和表達水平，降低表達毒性。
2、表達載體構建
選用高效啟動子、融合標簽及篩選標記，構建穩定表達載體，便于蛋白純化和功能檢測。
3、表達條件優化
調節誘導劑濃度、培養溫度及表達時間，提升蛋白溶解度和活性。
4、蛋白純化與鑒定
采用親和層析、離子交換和凝膠過濾等多種純化手段，結合SDS-PAGE、Western blot及質譜確保蛋白純度和結構完整。
5、翻譯后修飾分析
檢測糖基化、磷酸化等修飾狀態，確保蛋白功能和穩定性。

常見問題 FAQ
Q1：蛋白表達系統有哪些類型？
主要包括原核表達系統、酵母表達系統、昆蟲細胞表達系統、哺乳動物表達系統及無細胞表達系統等。
Q2：如何優化蛋白表達效率？
通過基因密碼子優化、表達載體設計和表達條件調控提高產量和可溶性。
Q3：無細胞表達的應用優勢是什么？
快速表達、易于操作、適合有毒或難表達蛋白。
Q4：為什么需要進行蛋白純化？
純化能去除雜質，獲得高純度目標蛋白，保障后續結構和功能研究。
Q5：翻譯后修飾的作用是什么？
修飾影響蛋白活性、穩定性和細胞定位，尤其對復雜蛋白功能至關重要。
Q6：如何解決蛋白表達中包涵體問題？
通過降低表達溫度、添加融合標簽或輔助伴侶蛋白可以提升蛋白可溶性。