脫靶網站CHOPCHOP
1.脫靶網站CHOPCHOP
CHOPCHOP是用于設計基因敲除用sgRNA,還可以用來設計基于CRISPR的基因激活、沉默等,同時也是針對多種物種的。
首先在官網界面,輸入基因名字或Fasta序列,選擇相應的物種,然后點擊運行即可搜尋候選的sgRNA
以5593為例:輸入基因名字、選擇芝麻物種

結果界面:

選擇排名第一的:TTGTGACGGAATGAGACGGGCGG
根據文件設計引物:
F:ATTGTTGTGACGGAATGAGACGGGCGG
R:AAACCCGCCCGTCTCATTCCGTCACAA
TTGTGACGGAATGAGACGGGCGG
CCGCCCGTCTCATTCCGTCACAA

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